STUDIO IN VITRO SUI MECCANISMI PATOGENETICI ASSOCIATI ALLA VIRULENZA DI LEGIONELLA PNEUMOPHILA

Obiettivo. Comprendere i meccanismi di virulenza di Legionella pneumophila nei confronti dell’ospite attraverso lo studio delle interazioni tra Legionella e macrofagi umani.Materiali e metodi. Per lo studio sono stati testati ceppi di Legionella pneumophila appartenenti al sierogruppo 1, ceppo altamente virulento responsabile di un caso clinico, e ai sierogruppi 6 e 9, confrontati con il ceppo di riferimento Philadelphia 1 (ATCC 33152) e saggiati su cellule macrofagiche umane in linea continua (U937). Sono state studiate l’attività citotossica, misurata come sopravvivenza fino a 72 ore dei macrofagi dopo contatto con Legionella a diverse concentrazioni (MOI); l’attività citopatogena, valutata come vitalità macrofagica dopo l’esposizione a Legionella per 2 ore; la crescita/sopravvivenza di Legionella nelle cellule ospiti e infine la produzione di citochine.Risultati. Nei tests di citotossicità la sopravvivenza dei macrofagi si modificava solo dopo 48 ore e alla MOI 1:1 dopo 72 ore il sierogruppo 1 si associava ad una significativa minore sopravvivenza delle U937 (35% vs 65%-76% degli altri sierogruppi) (p<0.05). Un comportamento analogo si è evidenziato per l’attività citopatogena alla MOI 10:1. I dati di crescita intramacrofagica suggerivano una maggior capacità del sierogruppo 1 ad entrare nel macrofago: dopo 2 ore le legionelle erano da 2 a 4 volte più concentrate rispetto agli altri ceppi. Il sierogruppo 9 invece manifestava una crescita più elevata solo dopo 48 ore.Discussione. I dati preliminari dello studio sembrano confermare che ceppi appartenenti a diversi sierogruppi di Legionella pneumophila possono avere caratteristiche di virulenza differenti, in grado di spiegare una diversa capacità di dare malattia. In particolare, il sierogruppo 1 manifestava una più rapida crescita intracellulare e una maggiore attività citotossica e citopatogena. Il sierogruppo 9 invece, più raramente coinvolto nella comparsa di malattia, pur crescendo attivamente nelle cellule macrofagiche, non era in grado di causarne la distruzione.